紫外(wai)分(fen)(fen)光(guang)(guang)光(guang)(guang)度(du)(du)(du)計基(ji)本工(gong)作(zuo)原理和紅外(wai)光(guang)(guang)譜(pu)儀相似，利用一定(ding)頻率的(de)(de)(de)(de)(de)紫外(wai)可(ke)(ke)見(jian)光(guang)(guang)照射被分(fen)(fen)析(xi)的(de)(de)(de)(de)(de)有機物質(zhi)，引起分(fen)(fen)子中價電子的(de)(de)(de)(de)(de)躍遷，它將有選擇地被吸收(shou)。一組吸收(shou)隨波(bo)長而(er)變化的(de)(de)(de)(de)(de)光(guang)(guang)譜(pu)，反映了試樣的(de)(de)(de)(de)(de)特征。在(zai)紫外(wai)可(ke)(ke)見(jian)光(guang)(guang)的(de)(de)(de)(de)(de)范圍內，對于一個特定(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)波(bo)長，吸收(shou)的(de)(de)(de)(de)(de)程度(du)(du)(du)正比于試樣中該(gai)成(cheng)分(fen)(fen)的(de)(de)(de)(de)(de)濃度(du)(du)(du)，因此測量光(guang)(guang)譜(pu)可(ke)(ke)以進行定(ding)性分(fen)(fen)析(xi)，而(er)且根據吸收(shou)與已知濃度(du)(du)(du)的(de)(de)(de)(de)(de)標樣的(de)(de)(de)(de)(de)比較(jiao)，還(huan)能(neng)進行定(ding)量分(fen)(fen)析(xi)。

紫外-可見分光光度計的類型很多，但可歸納為三種類型，即單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。
? ? ? ?1、單光束分光光度計：經單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶液，以進行吸光度的測定。這種簡易型分光光度計結構簡單，操作方便，維修容易，適用于常規分析。
? ? ? ?2、雙光束分光光度計：經單色器分光后經反射鏡分解為強度相等的兩束光，一束通過參比池，一束通過樣品池。光度計能自動比較兩束光的強度，此比值即為試樣的透射比，經對數變換將它轉換成吸光度并作為波長的函數記錄下來。雙光束分光光度計一般都能自動記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時分別通過參比池和樣品池，還能自動消除光源強度變化所引起的誤差。
? ? ? ?3、雙(shuang)波(bo)長(chang)(chang)分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)：由同一光(guang)源發出的(de)光(guang)被分(fen)(fen)成(cheng)兩(liang)束，分(fen)(fen)別(bie)經過(guo)(guo)兩(liang)個(ge)單(dan)色器(qi)，得到兩(liang)束不同波(bo)長(chang)(chang)1和2 的(de)單(dan)色光(guang)；利用(yong)切光(guang)器(qi)使兩(liang)束光(guang)以(yi)一定的(de)頻率交替照(zhao)射同一吸收池，然后(hou)經過(guo)(guo)光(guang)電倍增管和電子控制系統，最后(hou)由顯示器(qi)顯示出兩(liang)個(ge)波(bo)長(chang)(chang)處的(de)吸光(guang)度(du)差值。對(dui)于多組分(fen)(fen)混(hun)合物(wu)、混(hun)濁試樣(yang)（如生物(wu)組織液(ye)）分(fen)(fen)析，以(yi)及存(cun)在背景干擾或共存(cun)組分(fen)(fen)吸收干擾的(de)情況下，利用(yong)雙(shuang)波(bo)長(chang)(chang)分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度(du)法，往往能提高方(fang)法的(de)靈(ling)敏度(du)和選擇性。利用(yong)雙(shuang)波(bo)長(chang)(chang)分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)，能獲得導數光(guang)譜。通過(guo)(guo)光(guang)學(xue)(xue)系統轉(zhuan)換(huan)，使雙(shuang)波(bo)長(chang)(chang)分(fen)(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)能很方(fang)便地轉(zhuan)化(hua)(hua)為單(dan)波(bo)長(chang)(chang)工作方(fang)式。如果能在1和2處分(fen)(fen)別(bie)記錄(lu)吸光(guang)度(du)隨時間變化(hua)(hua)的(de)曲線，還能進行化(hua)(hua)學(xue)(xue)反應動力學(xue)(xue)研究。